Debido a su organismo extremamente sensible, la mortalidad precoz en el camarón patiblanco es resultado de la baja inmunidad

De acuerdo con un estudio realizado por ICC Brazil, el síndrome de mortalidad precoz (EMS), también conocido como síndrome de necrosis hepatopancreática aguda (AHPNS), es una enfermedad peligrosa causada por la bacteria Vibrio parahaemolyticus.

Desde que la EMS fue reportada en China en 2009, se ha extendido a Vietnam, Malasia, Tailandia y México, causando una pérdida anual de más de mil millones de dólares. Los brotes de EMS ocurren normalmente en los primeros 30 días tras la creación de tanques de camarones recién nacidos, y la mortalidad puede superar el 70%.

La enfermedad es transmitida oralmente y la bacteria coloniza el tracto gastrointestinal del camarón, produciendo una toxina que causa la destrucción del tejido y disfunción del órgano digestivo, conocido como hepatopáncreas.

El objetivo de este estudio era evaluar el efecto de ImmunoWall® como un aditivo capaz de reducir el impacto de la bacteria Vibrio parahaemolyticus, agente de EMS, en camarones patiblancos jóvenes (Litopenaeus vannamei).

Investigación

Fueron realizados 3 tratamientos durante el estudio

1. Alimento comercial estándar para camarones (Litopenaeus vannamei).
2. Alimento comercial que contiene 5 kg de ImmunoWall® por tonelada métrica de alimento.
3. Alimento comercial que contiene 10 kg de ImmunoWall® por tonelada métrica de alimento.

Los camarones sanos (PL 8) fueron comprados de una incubadora comercial en la provincia de Chachoengsao. Antes de comenzar el estudio, los camarones pasaron por cinco días de adaptación al tanque. El camarón PL12 fue colocado en un acuario de vidrio de 100 L con una salinidad de 20 ppt. La densidad de población inicial fue de 180 camarones PL12 por acuario (360 ind./ m²). La frecuencia de alimentación fue de cuatro veces al día, a las 7:00, 11:00, 15:00 y 19:00 horas.

La composición es una versión aproximada del alimento del estudio, como: humedad, proteína, lípidos, fibra y cenizas.

Tolerancia al estrés de temperatura y salinidad

Los camarones fueron transferidos al tanque de estudio para tolerancia al estrés de temperatura a 35 ºC.  Cada tratamiento presentó cuatro repeticiones con 10 camarones cada uno. La temperatura fue incrementada continuamente hasta 35 ºC, y fue controlada en este nivel. La tasa de mortalidad fue registrada diariamente durante 10 días.

El estudio de tolerancia al estrés de salinidad fue realizado en 35 ppt. Los camarones fueron transferidos a la unidad de prueba y criados en estas condiciones. Cada tratamiento presentó tres repeticiones, con 15 camarones por repetición. La tasa de mortalidad fue registrada diariamente durante 10 días.

Desafío con Vibrio parahaemolyticus

Después de los 30 días del período inicial, los camarones de cada tratamiento fueron transferidos al acuario de desafío, con una densidad de población de 20/acuario. Cada tratamiento tuvo 4 repeticiones. La bacteria virulenta, Vibrio parahaemolyticus, fue introducida por tratamiento de inmersión para determinar la capacidad del camarón para resistir al vibrión patógeno.

Cultivo de Vibrio parahaemolyticus

Un día antes del desafío, la bacteria Vibrio parahaemolyticus fue cultivada en caldo de cultivo de nutriente con NaCl a 1,5% (p/v). Treinta horas después del cultivo, el caldo de cultivo fue centrifugado para recoger la célula bacteriana. El patógeno fue lavado 2-3 veces y ajustado a 10¹²  antes de su uso.

Tratamiento de inmersión

La prueba de desafío con Vibrio parahaemolyticus fue estudiada usando tratamiento de inmersión en condiciones normales y en condiciones de estrés de salinidad durante un día antes del desafío.

Ocho camarones de cada tratamiento fueron aleatoriamente recolectados y transferidos al criadero en acuario de 50 L con un nivel de agua de 20 L y agua marina de 20 ppt (salinidad) para la condición normal.

El desafío fue repetido 4 veces por tratamiento, con 20 camarones por repetición. Los camarones fueron sometidos a un tratamiento de inmersión con dosis de infección de 1,0-2,9 x10¹² UFC/mL. Durante el período de desafío, el agua recibió aireación intensa.

La tasa de mortalidad fue registrada periódicamente durante 10 días. Tras cinco días de desafío, las bacterias Vibrio spp. fueron contabilizadas en el hepatopáncreas de cada grupo por agar TCB para confirmar la contaminación por el patógeno y la inmunidad del camarón para defenderse de esta bacteria.

Para la condición de estrés por salinidad y desafío por inmersión, 45 camarones de cada tratamiento fueron transferidos a un acuario de 50 L con un nivel de agua de 20 L y agua marina de 5 ppt. La prueba de desafío fue repetida 4 veces por tratamiento, con 15 camarones por repetición.

Los camarones fueron sometidos a un tratamiento de inmersión con dosis de infección de 3,0-3,5 x10¹² UFC/mL. Durante el período de desafío, el agua recibió aireación intensa.

Tras cinco días de desafío, las bacterias Vibrio spp. fueron contabilizadas en el hepatopáncreas de cada grupo por agar TCB para confirmar la contaminación por el patógeno y la inmunidad del camarón para defenderse de esta bacteria.

Este estudio fue realizado como un diseño completamente al azar.  Todos los datos fueron analizados usando ANOVA (análisis de varianza) unilateral. La Prueba del rango Múltiple de Duncan fue usada para determinar las diferencias entre los promedios de tratamiento. Toda la investigación fue realizada en el Nutrition and Aquafeed Laboratory, Department of Aquaculture, Faculty of Fisheries, Kasetsart University, Bangkok, Tailandia.

Resultados

Los resultados mostraron que no hubo diferencias significativas en la mortalidad de camarones tras la condición de estrés en temperatura y salinidad durante 10 días. La alta temperatura de 35 ^oC indujo la mortalidad en los primeros cuatro días. Después de eso, el camarón toleró esa condición de alta temperatura. Para el estrés por salinidad, todos los camarones sobrevivieron en la condición propuesta, lo que significa que los camarones pueden adaptar su fisiología en un ambiente de alta salinidad.

Los efectos de ImmunoWall® sobre la resistencia a la enfermedad en camarones patiblancos (Litopenaeus vannamei) por tratamiento de inmersión son significativos. Además, mostraron diferencias tras el Desafío de Vibrio parahaemolyticus en condiciones normales y de estrés por salinidad.

En condiciones normales, la tasa de mortalidad en el grupo de control fue mayor que en el grupo de camarones alimentados con ImmunoWall®. El recuento de Vibrio spp. del hepatopáncreas del camarón tras el desafío del camarón patiblanco demostró que el grupo de camarones alimentados con 1% de ImmunoWall® había mejorado la capacidad de la hemolinfa de defenderse contra la bacteria virulenta, seguido por el grupo de 0,5% de ImmunoWall® y grupo de control, respectivamente.

En condiciones de estrés de 35 ppt, la mortalidad de los camarones tras el desafío con Vibrio parahaemolyticus mostró diferencias significativas. Los camarones alimentados con ImmunoWall® mostraron la menor mortalidad. El recuento de Vibrio spp. del hepatopáncreas del camarón tras el desafío demostró que el grupo de camarones alimentados con una dieta de 1% de ImmunoWall® mejoró la capacidad de la hemolinfa para defenderse contra la bacteria virulenta, en comparación al grupo con 0,5% de ImmunoWall® o el grupo de control.

Conclusión

ImmunoWall® demostró ser eficaz en la reducción de la mortalidad de camarones patiblancos (Litopenaeus vannamei) expuestos a la condición de estrés por temperatura, alta salinidad y/o inmersión con Vibrio parahaemolyticus, que es el agente de EMS.

Los mejores resultados fueron obtenidos con ImmunoWall® para los niveles de inclusión durante el estrés por alta salinidad (35 ppt). Como Vibrio parahaemolyticus es una bacteria halófila, esta se desarrolla y prolifera mejor en niveles de salinidad medios a altos. La actividad inmunomoduladora del grupo con dieta de ImmunoWall® aumentó la supervivencia de los camarones en 50% en comparación con el grupo de control.

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